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紫外分析儀系列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長(zhǎng)引進(jìn)電泳分析、檢測(cè),PCR產(chǎn)物檢測(cè),DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等
紫外分析儀系列原理及應(yīng)用
紫外分析儀是熒光技術(shù)的應(yīng)用,熒光技術(shù)是什么呢? 首先了解一下什么是熒光,熒光又作"螢光",是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長(zhǎng)的入射光(通常是紫外線(xiàn)或X射線(xiàn))照射,吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長(zhǎng)長(zhǎng)的出射光(通常波長(zhǎng)在可見(jiàn)光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱(chēng)之為熒光。 知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光技術(shù)。熒光技術(shù)是某些物質(zhì)受一定波長(zhǎng)的光激發(fā)后,在極短時(shí)間內(nèi)(10-8秒)會(huì)發(fā)射出波長(zhǎng)大于激發(fā)波長(zhǎng)的光,這種光稱(chēng)為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應(yīng)用及有關(guān)的方法稱(chēng)為熒光技術(shù)(fluorescent technique)。
物質(zhì)經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況,第一種是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線(xiàn)照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱(chēng)為自發(fā)熒光;第二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過(guò)紫外線(xiàn)照射發(fā)出熒光,稱(chēng)為誘發(fā)熒光。
熒光技術(shù)在生物化學(xué)及分子生物學(xué)研究中應(yīng)用主要包括以下幾個(gè)方面:
1、物質(zhì)的定性:不同的熒光物質(zhì)有不同的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可用熒光進(jìn)行物質(zhì)的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。
2、定量測(cè)定:利用在較低濃度下熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比這一關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測(cè)定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測(cè)定的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,例如維生素B2的測(cè)定限liang可達(dá)1毫微克/毫升,這一優(yōu)點(diǎn)使測(cè)定時(shí)所需要樣品量大大減少。 這種定量測(cè)定方法還可應(yīng)用于酶催化的反應(yīng),只要反應(yīng)前后有熒光強(qiáng)度的變化,就可用來(lái)測(cè)定酶的含量及酶反應(yīng)的速率等。
3、研究生物大分子的物理化學(xué)特性及其分子的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象:熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數(shù)不僅和分子內(nèi)熒光發(fā)色基團(tuán)的本身結(jié)構(gòu)有關(guān),而且還強(qiáng)烈地依賴(lài)于發(fā)色團(tuán)周?chē)沫h(huán)境,即對(duì)周?chē)h(huán)境十分敏感。利用此特點(diǎn)可通過(guò)測(cè)定上述有關(guān)熒光參數(shù)的變化來(lái)研究熒光發(fā)色團(tuán)所在部位的微環(huán)境的特征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發(fā)色團(tuán)(如se氨酸、luo氨酸、鳥(niǎo)苷酸等,此類(lèi)熒光稱(chēng)為內(nèi)源熒光)以外,可將一些特殊的熒光染料分子共價(jià)地結(jié)合或吸附在生物大分子的某一部位,通過(guò)測(cè)定該染料分子的熒光特性變化來(lái)研究生物大分子,這種染料分子被稱(chēng)為"熒光探針",它們發(fā)出的熒光一般稱(chēng)為外源熒光。熒光探針的應(yīng)用,大大地開(kāi)拓了熒光技術(shù)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用范圍。
4、利用熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)可以研究生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象:通過(guò)該現(xiàn)象的研究,可以獲得生物大分子內(nèi)部的許多信息。
以往人們常用熒光偏振做指標(biāo)來(lái)研究生物大分子動(dòng)力學(xué)。人們趨于用熒光偏振隨時(shí)間的衰減來(lái)研究這些問(wèn)題。在這種方法中,激發(fā)光不是一連續(xù)的面偏振光,而是一偏振的光脈沖,因此測(cè)得的F∥和F是在兩個(gè)不同方向上偏振的熒光隨時(shí)間的衰減,它既和熒光壽命τ有關(guān),又與分子在溶液中的運(yùn)動(dòng)有關(guān),因此常表示為F∥(t)和F⊥(t)。由它們可得一相當(dāng)重要的物理量--各向異性參數(shù)A(t)。由A(t)可推測(cè)生物大分子的形狀、分子轉(zhuǎn)動(dòng)弛豫時(shí)間(即從一個(gè)定向的狀態(tài)到一個(gè)無(wú)定向狀態(tài)所要的時(shí)間),進(jìn)而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉(zhuǎn)動(dòng)角度和時(shí)間之間的函數(shù)關(guān)系。由這些結(jié)果可以研究分子之間的相互作用、分子間結(jié)合的緊密程度、蛋白質(zhì)、核酸分子的解聚程度等等。
另外,熒光技術(shù)在免疫學(xué)中亦有廣泛的應(yīng)用。最重要的就是熒光抗體法。將某些熒光染料與血清抗體相結(jié)合,這種標(biāo)記的抗體仍可專(zhuān)一地與相應(yīng)抗原發(fā)生結(jié)合,形成的復(fù)合體具有熒光特性,從而可以確定抗原或抗體的存在及其含量。
利用熒光技術(shù)設(shè)計(jì)的紫外分析儀主要是物質(zhì)的定性方面的應(yīng)用,包括:
⑴在科學(xué)實(shí)驗(yàn)工作中檢測(cè),許多主要物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷酸等。
⑵在藥物生產(chǎn)和研究中,可用來(lái)檢查激素生物堿,維生素等各種能;產(chǎn)生熒光藥品質(zhì)量,特別適宜作薄層分析和紙層分析斑點(diǎn)和檢測(cè)。
⑶在染料涂料橡膠、石油等化學(xué)行業(yè)中,測(cè)定各種熒光材料,熒光指示劑及添加劑,鑒別不同種類(lèi)的原油和橡膠制品。
⑷紡織化學(xué)纖維中可測(cè)定不同種類(lèi)的原材料。如羊毛,真絲人造纖維,棉花,合成纖維,并可檢查成品質(zhì)量。
⑸在糧油,蔬菜,食品部門(mén),可用于檢查毒素(如黃qu霉素等),食品添加劑,變質(zhì)的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的質(zhì)量。
⑹在地質(zhì)、考古等部門(mén),可起到發(fā)現(xiàn)各種礦物質(zhì),判別文物化石的真?zhèn)巍?/span>⑺在公安部門(mén)可檢查指紋、測(cè)定密寫(xiě)字跡等。
暗箱式:
用途及適用范圍
該儀器是提供白光和紫外光照射的裝置。主要用于蛋白質(zhì)電泳觀察、照相。帶箱內(nèi)照明及相機(jī)升降裝置。
結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)
YLN-II型熒光紫外儀帶有暗箱,無(wú)需暗室,可在明室中全天候使用。該儀器下部為白光透射燈箱,白光照度大。箱體上部配備有兩種波長(zhǎng)的紫外光源,波長(zhǎng)分別為254nm、365nm,燈管啟輝快,無(wú)頻閃。抽屜式可見(jiàn)光燈箱。
規(guī)格
1. 紫外光源照射窗口有效尺寸應(yīng)不小于:反射190mm×41mm。白光光源透射窗口有效尺寸:238mm×198mm;
2. 紫外光源波長(zhǎng):反射:254nm、365nm;
3. 透紫燈的功率:波長(zhǎng)為365nm的紫外燈,功率為28W;波長(zhǎng)為254nm的紫外燈,功率為28W;
4. 紫外玻璃透光率:對(duì)波長(zhǎng)為230nm~400nm的紫外光透過(guò)率不小于40%;
5. 各波長(zhǎng)的紫外光源的窗口輻照度應(yīng)不小于10μW/cm2;\
6. 外型尺寸(L×W×H)490×360×430(mm);
日常維護(hù)保養(yǎng)方法
1. 本儀器應(yīng)放置在陰涼、干燥、無(wú)灰塵和無(wú)酸堿、蒸汽的地方,儀器使用環(huán)境應(yīng)清潔。長(zhǎng)時(shí)間不用應(yīng)拔下電源插頭,并蓋上防護(hù)罩;
2. 不要將水和液體濺到儀器上;
3. 燈箱上放置被觀察物的玻璃如有污穢,可用酒精棉球擦干凈。
照相式
用途及適用范圍
該儀器是提供紫外光照射的裝置??捎糜诤怂犭娪灸z樣品的觀察、照相等方面,帶紫外防護(hù)罩和相機(jī)升降裝置。
結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)
紫外儀是在暗室中使用的紫外分析儀,該儀器配備三種波長(zhǎng)的紫外光源,透射為300nm,反射為254與365nm,您可根據(jù)自己的需要,單獨(dú)使用其中某個(gè)波長(zhǎng),亦可同時(shí)使用幾種波長(zhǎng)。本產(chǎn)品選用電子鎮(zhèn)流器,整機(jī)重量輕,燈管啟輝快,無(wú)頻閃。
規(guī)格
1. 透紫外光源照射窗口有效尺寸:透射窗:200mm×150mm,反射窗:190mm×41mm;
2. 紫外光源波長(zhǎng):透射:300nm,反射:254nm、365nm;
3. 紫外燈功率:波長(zhǎng)為365nm的紫外燈,功率為28W;波長(zhǎng)為300nm的紫外燈,功率為8W;波長(zhǎng)為254nm的紫外燈,功率為28W;
4. 電源條件:電源電壓:單相正弦交流220V±22V;頻率:50Hz±1Hz;
5. 輸入功率:不大于220VA;
6. 外型尺寸(L×W×H)440 ×340 ×120(mm);
日常維護(hù)保養(yǎng)方法
1. 本儀器要放置在陰涼、干燥、無(wú)灰塵和無(wú)酸堿、蒸汽的地方。
2. 放置被觀察物的紫玻璃和黑板上如有污穢,可用酒精棉球擦干凈。
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